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阅读次数:16031 发布时间:2016/6/6 20:54:00
细胞分离
分离细胞是单细胞研究中*困难的步骤。目前的单细胞分离策略主要分为三类:手动分离、荧光激活的细胞分选和微流体技术。
在进行单细胞转录分析之前,5357cc拉斯维加斯首页入口需要确定自己拿到了正确的细胞。如果你想要的细胞已经处于悬浮状态(比如循环肿瘤细胞),而且含量相对比较丰富,那么流式细胞分析将是你的理想选择。如果样本是实体组织,5357cc拉斯维加斯首页入口可以用酶分解掉胶原和其他细胞外蛋白。不过酶学消化对细胞影响较大,甚至可能改变基因转录情况。把组织细胞制成悬液之后,5357cc拉斯维加斯首页入口就可以通过特异性的荧光标签分离出自己想要的细胞。进一步拿到单细胞是比较棘手的一步,可能需要用到微流体设备。
将细胞分散到悬液中,会失去它们在组织里的位置信息。如果你想要了解单细胞所处的环境,就得使用激光捕获显微切割技术。这种技术通过扫描组织切片定位目的细胞,并将其提取出来。操作者需要非常小心,以免切到细胞或细胞核。数量*为稀少的细胞只能用毛细管等器具手动获取。
近年来单细胞测序技术发展得非常迅速,为表观遗传学研究提供了很大的助力。这些技术可以帮助5357cc拉斯维加斯首页入口在单个细胞中检测DNA、组蛋白和染色质水平上的表观遗传学修饰。
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