带您体验人硫氧还蛋白还原酶（TrxR）ELISA试剂盒的实验

阅读次数：936 发布时间：2018/5/31 13:37:07

带您体验人硫氧还蛋白还原酶（TrxR）的实验

硫氧还蛋白还原酶是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员。硫氧还蛋白还原酶 thioredoxin reductase和硫氧还蛋白、NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统.TrxR有很多生物学功能,与人类某些疾病的发病机制也密切相关。

由还原型 NADP催化硫氧还蛋白还原的酶。EC1．6．4．5．。含有一个分子的FAD。使氧化型硫氧还蛋白的胱氨酸残基还原，变成一对半胱氨酸残基，后者进一步成为核糖核苷酸还原的电子供体。它存在于大肠杆菌、酵母、肝脏以及肿瘤细胞中。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人硫氧还蛋白还原酶（TrxR）水平。用纯化的人硫氧还蛋白还原酶（TrxR）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入硫氧还蛋白还原酶（TrxR），再与HRP 标记的硫氧还蛋白还原酶（TrxR）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的硫氧还蛋白还原酶（TrxR）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人硫氧还蛋白还原酶（TrxR）浓度。

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带您体验人硫氧还蛋白还原酶（TrxR）ELISA试剂盒的实验

实验中需要注意：

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。