PI 凋亡检测试剂盒现货促销，欢迎垂询！
产品说明 ：
细胞凋亡是细胞的基本特征，在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用 。Annexin V 是一种分子量为 35.8 KD 的 Ca2+依赖性磷脂结合蛋白 ，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）高亲和力特异结合 。FITC-Annexin V 结合到凋亡细胞后，在蓝色光的激发下，发出绿色荧光，区分出凋亡细胞与正常细胞。碘化丙啶（Propidium iodide ，PI）是一种核酸染料 ，它不能穿透完整细胞膜，但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜能够穿透，并使细胞核红染 。将 FITC-Annexin V 与 PI 匹配使用，可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞区分开来。
操作方法：
1 、 用 27ml 的去离子水稀释 3ml Binding Buffer（10×）至 30ml，每次用 3ml。
2、 收集细胞（1×106 个/次），然后用冷的 PBS 洗涤。（对于贴壁细胞，先用胰酶消化，再用 PBS 洗涤）。
3、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 悬浮细胞 ，300×g 离心 10min，弃上清。
4 、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 重悬细胞，使细胞的密度达到 1×106 个/ml 。
5 、 每管加入 100μL 细胞（1×105 个） 。
6、 再向管中加入 5μL Annexin V-FITC 。
7 、 室温，避光，轻轻地混匀 ，10min 。
8、 加入 5μL PI ，室温 ，避光 ，孵育 5min。
9 、 加入 PBS 至 500μL，轻轻混匀 。
10、在 1 小时内用流式细胞仪检测。1 、 用 27ml 的去离子水稀释 3ml Binding Buffer（10×）至 30ml，每次用 3ml。2、 收集细胞（1×106 个/次），然后用冷的 PBS 洗涤。（对于贴壁细胞，先用胰酶消化，再用 PBS 洗涤） 。
3、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 悬浮细胞，300×g 离心 10min ，弃上清。
4、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 重悬细胞，使细胞的密度达到 1×106 个/ml。
5 、 每管加入 100μL 细胞（1×105 个）。
6、 再向管中加入 5μL Annexin V-FITC。
7、 室温，避光，轻轻地混匀，10min 。
8 、 加入 5μL PI ，室温，避光，孵育 5min。
9、 加入 PBS 至 500μL ，轻轻混匀。
10 、在 1 小时内用流式细胞仪检测 。
注意事项：
1、旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2 、Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质，在保存与操作时请注意避光 。
3、Propidium iodide（PI）能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用 。
4 、在细胞洗涤的*后一步，请尽量将上清弃净 ，以免 PBS 残留影响实验结果
5 、PI 染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高 ，建议首行 Annexin V-FITC 染色，上机前 5分钟再加入 PI 染色。
6、整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在 4℃下操作。
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