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公司新闻

RIPA裂解液多种款式,现货供应

阅读次数:889    发布时间 :2021/6/7 11:18:45

 RIPA裂解液多种款式,现货供应


描述:RIPA裂解液对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分有较强裂解作用,是常用的细胞组织快速裂解液。使用RIPA 裂解液加强型
特别适于western blot和大多数蛋白-蛋白相互作用的实验等。PMSF能抑制蛋白酶对蛋白的降解 。

规格 :100ml

储存:RIPA裂解液  4℃保存      PMSF粉末 (100mM) -20℃保存 PMSF溶液l  -20℃保存    以上组分12个月有效


 
制备组织裂解产物(预先将PMSF溶剂加入PMSF粉末中混匀,按1:99比例加入RIPA裂解液中)
1.      取50-100 mg组织在冰上剪成碎片 ,用预冷的PBS洗涤2次离心弃去PBS;
2.      加入 0.5-1 ml 预冷 RIPA 裂解缓冲液;
3.      4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40次 ,直到95%的细胞被破碎,然后在冰浴中放置10分钟 ,并每隔5分钟在漩涡混合仪上振荡30秒 ;
4.      12000g 4℃离心10分钟,将上清转移到新的离心管中  ,即得组织总蛋白产物;
5.      假如所得蛋白产物较为粘稠 ,95℃加热5分钟 ,然后迅速冰浴5分钟,12000g 4℃离心10分钟 ,将上清转移到新的离心管中,即得组织总蛋白产物;
6.      20%的甘油保存于 -70oC 或-20oC。
注意:
1.         在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物;
2.         在做免疫沉淀或免疫共沉淀时在实验前进行蛋白的提取 ,以避免某些不稳定蛋白的降解 ;
3.         PMSF溶液易降解,请于-20oC保存 ,按比例现用现加 。


相关产品如下:
RIPA裂解液(弱)
RIPA裂解液(中)
RIPA裂解液(强)
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