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琥珀酸脱氢酶(SDH)检测试剂盒现货促销

阅读次数:1009    发布时间:2021/8/18 16:44:12

琥珀酸脱氢酶(SDH)检测试剂盒现货促销


产品说明 :
SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体
内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提
供电子。
SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸 ,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),
并且在600nm处具有特征吸收峰 ,通过600nm吸光度的变化,测定2,6-DCPIP的还原速度,代表SDH酶活性。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者
增加样本量进行检测。
需自备的和用品 :
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机 、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿 、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

SDH 活性的计算
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟消耗1nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
SDH活性(U prot)=[(ΔA测定-ΔA空白)÷(ε×d)×V反总×10
9]÷(Cpr×V样) ÷T
=1555.556×(ΔA测定-ΔA空白)÷Cpr
(2) 按样本质量计算
单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟消耗1nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位 。
SDH活性(U/g 质量)=[(ΔA测定-ΔA空白)÷(ε×d)×V反总×10
9]÷(V样÷V样总×W) ÷T
=1571.111×(ΔA测定-ΔA空白)÷W
(3) 按细菌或细胞数量计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟消耗1nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位 。
SDH活性(U/10
4 cell)=[(ΔA测定-ΔA空白)÷(ε×d)×V反总×10
9]÷(V样÷V样总×500) ÷T
=3.142×(ΔA测定-ΔA空白)
V反总:反应体系总体积,0.98×10
-3L;ε:2,6-二氯吲哚酚摩尔消光系数 ,21×10
3L/mol/cm;d:比色皿光径 ,
1cm;V样 :加入样本体积 ,0.03mL;V样总 :加入试剂一和试剂二体积 ,1.01mL;T :反应时间,1min ;Cpr:样
本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g ;500:细菌或细胞总数,500万;10
9:单位换算系数,1mol=109nmol 。 

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