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尼氏染色液(硫堇法)

尼氏染色液(硫堇法)

点击次数 :387    发布时间 :2025/2/11 15:42:03

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详细内容

尼氏染色液(硫堇法)

一、尼氏体与尼氏染色液

尼氏体(Nissl body),或称尼氏小体,是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质。它能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染成紫蓝色 。尼氏染色液(Nissl Stain ,硫堇法)正是利用硫堇这种碱性染料对尼氏体进行染色的试剂。

二 、尼氏染色液(硫堇法)的组成与特点

尼氏染色液(硫堇法)主要由磷酸盐、硫堇等组成。它的主要特点包括:

操作简便:染色步骤相对简单,易于掌握 。

染色稳定:染色效果稳定 ,重复性好。

适用范围广:可用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色。

三、尼氏染色液(硫堇法)的染色步骤

尼氏染色液(硫堇法)的染色步骤通常包括 :

固定:新鲜组织固定于10%甲醛液中 ,常规脱水包埋 。

切片:石蜡切片厚8~15μm,常规脱蜡至水 。

染色 :将切片置于预热至5060℃的尼氏染色液中浸染3060分钟 。

分化:用蒸馏水稍洗后,用95%乙醇迅速分化 ,直至切片清晰 ,背景呈淡蓝色或无色。

脱水与封固:无水乙醇脱水,二甲苯透明  ,中性树胶封固。

四 、尼氏染色液(硫堇法)的染色结果

染色后 ,尼氏小体呈紫蓝色 ,细胞核呈淡蓝色 ,背景无色或浅蓝色 。这样的染色结果有助于清晰地观察神经细胞中尼氏体的形态和分布。

五、注意事项

尼氏体易溶解:尼氏体离体后容易溶解 ,因此组织取出后应立即固定,否则难以着色。

固定作用重要:组织固定起着非常重要的作用,固定可采用乙醇或中性福尔马林溶液。

染色液预热:染色液需提前预热至50~60℃,放入切片后开始计算染色时间。

分化要迅速:95%乙醇分化应迅速进行,肉眼观察至切片清晰 ,背景呈淡蓝色或无色为适宜


更新时间:2025/3/11 6:31:05

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