核酸提取辅助试剂(25:24:1替代试剂,pH＞7.8)

常见核酸提取辅助试剂(25:24:1)成分及作用

核酸提取辅助试剂(25:24:1)通常指的是酚::异戊醇试剂，这种试剂由水饱和酚、和异戊醇按25:24:1的体积比混合而成，主要用于RNA或DNA的提取。其中，苯酚使蛋白质变性，同时抑制了RNase的降解作用；加速有机相与液相分层，去除核酸溶液中的迹量酚；异戊醇减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。

二、替代试剂方案

Tris平衡酚（pH＞7.8）

成分：主要由苯酚、Tris-HCl反复溶解、平衡而得。

用途：用于DNA提取。

优势：具有特定的pH值（＞7.8），可能更适合某些特定的提取条件或后续实验需求。

注意事项：只能用于科研实验，严禁用于临床。贮存环境需为4℃环境保存。

核酸抽提辅助剂（替代物）

有效成分：1-溴-3-氯丙烷（1-Bromo-3-chloropropane）。

用途：作为的替代品，用于RNA或DNA抽提。

优势：毒性小，具有更强的疏水性，可形成紧密的中间层，减少试剂使用总量，对分离得到的RNA或DNA的质量和得率无影响。

使用方法：以试剂法抽提RNA为例，使用特定试剂盒进行单步法抽提RNA时，需按一定比例配入替代物。

注意事项：使用时需穿实验服，佩戴手套、口罩、面罩等防护用品；具有挥发性，应在通风橱中使用，并及时拧紧瓶盖。

三、选择替代试剂的考虑因素

实验需求：根据具体的实验需求和后续实验步骤选择合适的替代试剂。

试剂性能：考虑替代试剂的纯度、稳定性、毒性以及是否会对提取的核酸质量和得率产生影响。

成本效益：在保证实验效果的前提下，考虑试剂的成本和可获得性。

安全性：确保所选替代试剂符合实验室安全规定，不会对实验人员和环境造成危害。

更新时间：2025/3/11 6:31:05

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